如何设计sirna，如何设计自己的签名
电转染实验,如何设置siRNA实验对照组?
A：siRNA的贮存浓度就是保存的最佳浓度，锐博推荐的贮存液浓度为20μM；而siRNA的工作浓度就是使siRNA能够达到最佳沉默效果的转染浓度，一般10～100nM范围内，锐博生物推荐的转染浓度是50nM。
随机分组：使用随机分组的方法将被试随机分配到对照组和实验组中。这样可以避免潜在的个体差异对结果的影响，使得两组在开始时具有相似的特征。配对设计：当研究涉及到配对的因素时，可以采用配对设计。
默效果，减少副反应的发生。siRNA的设计可以通过检索，优先选用经过验证的siRNA或设计多对siRNA。需要强调的是，需要同时设置阴性对照以排 除非特异沉默现象和阳性对照以确认整个实验体系的有效性。
siRNA表达载体构建好后，即可进行RNA干扰主体实验。
对比控制：实验对照组的作用之一是提供对比控制的基准。通过设立对照组，研究者可以更好地了解实验组的变化情况，从而更准确地评估实验因子或干预措施的效果。
知不知道有哪些在线设计siRNA的网址
LifeTechnologies公司有个非常实用的在线shRNA设计软件，操作非常方便，而且设计出来的shRNA不再需要到NCBI上Blast，直接可以用的。
转染siRNA也不会差的。个人觉得细胞本身的性质决定了转染效率。不是的。针对GFP的siRNA和我们通常用的化学合成的siRNA一样，只不过是针对GFP基因的。
siRNA指的是小干扰RNA。小干扰RNA有时称为短干扰RNA或沉默RN，是一个长20到25个核苷酸的双股RNA，在生物学上有许多不同的用途。已知siRNA主要参与RNA干扰现象，以带有专一性的方式调节基因的表达。
构建植物siRNA有哪些表达载体?
磷酸钙共沉淀；电穿孔法；DEAE-葡聚糖和polybrene；机械法；阳离子脂质体试剂。
体内转录：最近有几个研究小组构建了一些可以在真核细胞内表达siRNA的载体，包括被广泛应用的质粒载体和新研发的转染效率较高的病毒载体。
siRNA表达框架：siRNA表达框架（siRNA：expression：cassettes，SECs）是一种由PCR得到的siRNA表达模版，包括一个RNA：polⅢ启动子，一段发夹结构siRNA，一个RNA：polⅢ终止位点，能够直接导入细胞进行表达而无需事前克隆到载体中。
多数的siRNA表达载体依赖RNA聚合酶III 启动子（pol III）中的一种，操纵一段45—50nt的发夹结构RNA（small hairpin RNA， shRNA）在哺乳动物细胞中的表达，shRNA在细胞内会自动被加工成为siRNA，从而引发基因沉默或者表达抑制。
的问题在于使siRNA导入细胞，将sirna导入细胞内常见的方法是 将靶向特定基因的大约21碱基长短的双链 siRNAs small interfering RNAs。或者是45 50 mer的发夹结构 RNA 转染到细胞。
②以烟草花叶病毒基因组为靶位，设计合成表达小干扰RNA（siRNA）寡聚核苷酸，亚克隆到植物双元表达载体Pbi121中，农杆菌瞬时表达，确定了TMV复制酶基因、外壳蛋白基因和运输蛋白基因的siRNA对TMV侵染的干扰作用和基因沉默机理。
